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脫氫酶(DHA)測試盒

簡要描述:

脫氫酶(DHA)測試盒是一類催化物質氧化還原反應的酶,催化底物通過細胞色素系統被氧化,釋放的能量供機體使用,是生物體取得能量的一種方式。

更新時間:2023-08-26;廠商性質:經銷商;覽量:391

商品詳情:
脫氫酶(DHA)測試盒測定意義

脫氫酶(dehydrogenase, DHA) 是一類催化物質氧化還原反應的酶,催化底物通過細胞色素系統被氧化,釋放的能量供機體使用,是生物體取得能量的一種方式。

測定原理

在細胞呼吸過程中,氫受體2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC)在脫氫酶作用下接受氫以后,被還原為三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone, TF),TF呈現紅色,于485nm測定其吸光值,即得脫氫酶活性。

自備實驗儀器及用品

天平、恒溫培養箱或水浴鍋、低溫離心機、酶標儀、96孔板、冰、蒸餾水、甲醇(不允許快遞,請用戶自備)。
試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1瓶(棕色),4℃避光保存。臨用前加入667μL無水乙醇,蓋緊后充分混勻,再加入9.333 mL蒸餾水混勻,避光保存。

試劑四:粉劑×1管,4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水,充分溶解。

標準品:粉劑×1瓶,臨用前加10 mL蒸餾水,充分溶解。1μmol/mL標準液,4℃避光保存。
商品屬性:

貨號

規格

檢測方法

YSH3469

100管/96樣

微量法

YSH3469-1

50管/48樣

可見分光光度法


測定操作:

1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min,調節波長到570 nm,蒸餾水調零。

2. 空白管:取EP管,加入10μL蒸餾水,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數次,于570nm測定吸光值,記為A空白管。顯色后務必在30min內測完。

3. 標準管:取EP管,加入10μL標準品,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數次,于570nm測定吸光值,記為A標準管。顯色后務必在30min內測完。

4. 測定管:取EP管,加入10μL上清液,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數次,于570nm測定吸光值,記為A測定管。顯色后務必在30min內測完。

注意:空白管和標準管只需要測定一次。

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